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標(biāo)臣動(dòng)態(tài)
VDSpher 精睿/經(jīng)典反相液相色譜分析柱
根據(jù)流動(dòng)相和固定相相對(duì)極性不同，液相色譜分為正相色譜和反相色譜。流動(dòng)相極性大于固定相極性的情況，稱為反相色譜。非極性鍵合相色譜可作反相色譜，在現(xiàn)代液相色譜中應(yīng)用最廣泛，現(xiàn)代液相色譜分析工作的70%以上是在非極性鍵合固定相上進(jìn)行的。
反相色譜是指利用非極性的反相介質(zhì)為固定相，極性有機(jī)溶劑的水溶液為流動(dòng)相，根據(jù)溶質(zhì)極性（疏水性）的差別進(jìn)行溶質(zhì)分離與純化的洗脫色譜法。反相色譜中溶質(zhì)也通過(guò)疏水性相互作用分配于固定相表面，但是反相色譜固定相表面完全被非極性基團(tuán)所覆蓋，表現(xiàn)出強(qiáng)烈的疏水性。因此，必須用極性有機(jī)溶劑（如甲醇、乙腈等）或其水溶液進(jìn)行溶質(zhì)的洗脫分離。
溶質(zhì)在反相介質(zhì)上的分配系數(shù)取決于溶質(zhì)的疏水性，一般疏水性越大，分配系數(shù)越大。當(dāng)固定相一定時(shí)，可以通過(guò)調(diào)節(jié)流動(dòng)相的組成調(diào)整溶質(zhì)的分配系數(shù)。反相色譜主要應(yīng)用于相對(duì)分子質(zhì)量低于5000，特別是1000以下的非極性小分子物質(zhì)的分析和純化。
反相介質(zhì)的商品種類繁多，其中最具代表性的是以硅膠為載體，通過(guò)表面鍵合非極性分子層制備。通過(guò)控制反應(yīng)時(shí)間和溫度，可獲得性能穩(wěn)定的反相介質(zhì)。在硅膠基質(zhì)的反相填料中，以鍵合有C18、C8、C4的球形多孔填料最為常見(jiàn)，用途最廣。反相色譜固定相大多是硅膠表面鍵合疏水基團(tuán)，基于樣品中的不同組分和疏水基團(tuán)之間疏水作用的不同而分離。
色譜柱是HPLC系統(tǒng)非常關(guān)鍵的一部分，隨著色譜技術(shù)的發(fā)展，它也不斷地更新?lián)Q代，長(zhǎng)度變得越來(lái)越短，填料顆粒也越來(lái)越細(xì)?，F(xiàn)在常用的色譜柱長(zhǎng)度在30～250 mm，顆粒直徑在1.6～5μm。顆粒類型主要有全多孔和表面多孔，全多孔填料具有更大的柱容量、更多鍵合相選擇的優(yōu)點(diǎn)，表面多孔具有反壓低、峰形好的優(yōu)點(diǎn)。
目前最常用的基質(zhì)是硅膠。以前填料純化技術(shù)不是很成熟，十八烷基鍵合到硅膠表面不是很完全，硅膠上總是少量的硅羥基裸露在外面。這樣就造成樣品在進(jìn)行色譜分離的時(shí)候，會(huì)吸附或者鍵合在這部分硅羥基上，導(dǎo)致色譜峰拖尾。使用三乙胺作為封尾劑，先行與硅羥基吸附，可以使峰型改善，這個(gè)三乙胺曾經(jīng)一度成為分析界的寶貝和機(jī)密。現(xiàn)在制造填料的技術(shù)日趨成熟，人們已經(jīng)掌握了把這部分剩余未鍵合硅膠也進(jìn)行鍵合鈍化的技術(shù)，這個(gè)技術(shù)就叫作封尾。
現(xiàn)在每家色譜柱的制造商都有其獨(dú)特的鍵合技術(shù)，常規(guī)的鍵合基團(tuán)有C18、C8、C4、苯基、氨基、氰基、硅膠等。C18和C8色譜柱是目前最常用、每個(gè)實(shí)驗(yàn)室必備的通用型色譜柱。填料是硅膠基質(zhì)上鍵合十八烷基、辛烷基，有較高的碳含量和較好的疏水性，適用于大多數(shù)化合物，包括非極性、極性小分子及一些多肽及蛋白質(zhì)。隨著每家色譜柱制造商的研發(fā)，C18和C8柱的類型還在不斷增加。適用pH范圍由原來(lái)的2～8，發(fā)展到現(xiàn)在1～14，與純水相的兼容性越來(lái)越好，某些色譜柱即使長(zhǎng)時(shí)間使用100%水相，也不會(huì)發(fā)生填料疏水塌陷。對(duì)于每位實(shí)驗(yàn)人員來(lái)說(shuō)，可供選擇的范圍日趨廣泛。
德國(guó)VDS Optilab色譜技術(shù)公司是具有31年開(kāi)發(fā)和生產(chǎn)液相色譜柱經(jīng)驗(yàn)的企業(yè)，特別是運(yùn)用反相液相色譜分離小分子化合物，產(chǎn)品品種和優(yōu)化的選擇更全面。用于小分子化合物色譜分離的C18固定相種類有9種、C8固定相種類有9種，按照硅膠純度不同，區(qū)分VDSpher（經(jīng)典）和VDSpher PUR（精睿）兩大系列，是同類產(chǎn)品線領(lǐng)域中最全供應(yīng)商之一。
VDSpher 經(jīng)典/精睿反相液相色譜填料
1、反相液相色譜填料種類：
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反相液相色譜填料 |
反相液相色譜填料鍵合類型 |
端基封尾技術(shù) |
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C18-E |
Monomeric bonding（單分子層鍵合） |
Liquid phase endcapping（封尾） |
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C18-SE |
Monomeric bonding（單分子層鍵合） |
Gas phase endcapping（全封尾） |
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C18-M |
Polymeric bonding（聚合物層鍵合） |
no endcapping（不封尾） |
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C18-M-E |
Polymeric bonding（聚合物層鍵合） |
Liquid phase endcapping（封尾） |
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C18-M-SE |
Polymeric bonding（聚合物層鍵合） |
Gas phase endcapping（全封尾） |
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C18-H |
Monomeric bonding（單層鍵合） |
Polar spacer（極性官能團(tuán)嵌入） |
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C18-NE |
Monomeric bonding（單分子層鍵合） |
no endcapping（不封尾） |
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OptiAqua C18 |
Monomeric bonding（單分子層鍵合） |
special polar endcapping（獨(dú)特封端） |
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OptiAqua C18 LL |
Monomeric bonding（單分子層鍵合） |
special polar endcapping（獨(dú)特封端） |
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C8-E |
Monomeric bonding（單分子層鍵合） |
Liquid phase endcapping（封尾） |
|
C8-SE |
Monomeric bonding（單分子層鍵合） |
Gas phase endcapping（全封尾） |
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C8-M |
Polymeric bonding（聚合物層鍵合） |
no endcapping（不封尾） |
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C8-M-II |
Polymeric bonding（聚合物層鍵合） |
no endcapping（不封尾） |
|
C8-M-E |
Polymeric bonding（聚合物層鍵合） |
Liquid phase endcapping（封尾） |
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C8-M-SE |
Polymeric bonding（聚合物層鍵合） |
Gas phase endcapping（全封尾） |
|
C8-H |
Monomeric bonding（單層鍵合） |
Polar spacer（極性官能團(tuán)嵌入） |
|
C8-NE |
Monomeric bonding（單分子層鍵合） |
no endcapping（不封尾） |
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C8-SB |
Monomeric bonding（單分子層鍵合） |
Gas phase endcapping（全封尾） |
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C4-E |
Monomeric bonding（單分子層鍵合） |
Liquid phase endcapping（封尾） |
|
C4-SE |
Monomeric bonding（單分子層鍵合） |
Gas phase endcapping（全封尾） |
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Phenyl-E |
Monomeric bonding（單分子層鍵合） |
Liquid phase endcapping（封尾） |
|
Phenyl-SE |
Monomeric bonding（單分子層鍵合） |
Gas phase endcapping（全封尾） |
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Phenyl-B |
Polymeric bonding（聚合物層鍵合） |
Liquid phase endcapping（封尾） |
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CN-RP |
Monomeric bonding（單分子層鍵合） |
Liquid phase endcapping（封尾） |
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CN-SE-RP |
Monomeric bonding（單分子層鍵合） |
Gas phase endcapping（全封尾） |
2、C18液相色譜填料性能-高柱效：120,000/m，當(dāng)今常規(guī)反相C18液相色譜柱最高柱效的代表。
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